resarПриродные ресурсы Арктики и СубарктикиArctic and Subarctic Natural Resources2618-97122686-9683Академия наук Республики Саха (Якутия)resar-1123Research ArticleБиологические науки. ЭкологияBiological sciences. EcologyИспользование метода «ДНК-комет» для детекции и оценки степени повреждений ДНК клеток организмов растений, животных и человека, вызванных факторами окружающей среды (обзор)Использование метода «ДНК-комет» для детекции и оценки степени повреждений ДНК клеток организмов растений, животных и человека, вызванных факторами окружающей среды (обзор)ФилипповЭдуард ВасильевичФилипповЭдуард Васильевич

ФИЛИППОВ Эдуард Васильевич – к.б.н.,с.н.с. ИБПК СО РАН, Edy73@mail.ru.

Edy73@mail.ruИБПК СО РАНРоссияИБПК СО РАНRussian Federation2014180220261927278Copyright © Филиппов Э.В., 20262026Филиппов Э.В.Филиппов Э.В.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://resar.elpub.ru/jour/article/view/1123

Воздействие неблагоприятных факторов окружающей среды на любую биологическую систему (одноклеточные, растения, животные, человек) сопровождается накоплением повреждений ДНК и изменением активности систем репарации, что может привести к возникновению мутаций и патологических изменений клетки и целостного организма. В обзоре проведена оценка эффективности метода «ДНК-комет» для детекции повреждений ДНК, вызванных различными факторами окружающей среды: радиационными, неионизирующими излучениями, химическими, психическими (для человека). Описаны методологические и методические основы метода. Метод обладает чувствительностью, необходимой для регистрации повреждений ДНК на уровне отдельной клетки, и может быть применен для оценки интегральной целостности генома. Области применения метода «ДНКкомет»: оценка «качества жизни» любой биологической системы в тех или иных экологических условиях среды обитания; биомониторинг, медицина, в частности онкология, токсикология, фармакология, эпидемиология и многие другие.

Influence of adverse factors of environment on any biological system (unicellular, plants, animals, human) is accompanied by accumulation of damages in cells DNA and change of reparation systems activity that may lead to emergence of mutations and pathological changes in cell and an integrated organism. The assessment of the efficiency of the «DNA comets» method for detection of DNA damages caused by various environmental factors – radioactive, not ionizing radiation, chemical, mental (for person) is presented in the review. Methodological and methodical bases of the method are described. The method has the sensitivity necessary for registration of DNA damages at the level of a cell, and can be applied for assessment of integrated integrity of a genome. Scopes of a method of «DNA comets»: assessment of «life quality» for any biological system in any ecological conditions of habitat; biomonitoring, medicine, in particular oncology, toxicology, pharmacology, epidemiology, etc.

повреждения ДНКмутациирепарацияапоптозгенотоксичностьинфекционные заболеванияонкологияDNA damagesmutationreparationapoptosisgenetic toxicityinfectious diseasesoncologyReferencesКузин А.М. Структурно-метаболическая теория в радиобиологии. – М.: Наука, 1986. – 283 с.Кузин А.М. Структурно-метаболическая теория в радиобиологии. – М.: Наука, 1986. – 283 с.Меерсон Ф.З. Адаптация, стресс и профилактика. – М.: Наука, 1981. – 278 с.Меерсон Ф.З. Адаптация, стресс и профилактика. – М.: Наука, 1981. – 278 с.The comet assay in toxicology / Dhawan A. and Anderson D. (Eds.); RSC Publisher, UK, London, 2009.The comet assay in toxicology / Dhawan A. and Anderson D. (Eds.); RSC Publisher, UK, London, 2009.Collins A.R. The comet assay for DNA damage and repair: principles, applications and limitations // Mol Biotech. – 2004. – V. 26. – P. 229–261.Collins A.R. The comet assay for DNA damage and repair: principles, applications and limitations // Mol Biotech. – 2004. – V. 26. – P. 229–261.Ostling O., Johanson K.J. Microelectrophoretic study of radiation-induced DNA damage in individual mammalian cells. Biochem Biophys Res Commun. – 1984. – 123. – С. 291–298.Ostling O., Johanson K.J. Microelectrophoretic study of radiation-induced DNA damage in individual mammalian cells. Biochem Biophys Res Commun. – 1984. – 123. – С. 291–298.Olive P.L., Banath J.P. The comet assay: a method to measure DNA damage in individual cells // Nat Protoc. – 2006. – 1 (1). – С. 23–29.Olive P.L., Banath J.P. The comet assay: a method to measure DNA damage in individual cells // Nat Protoc. – 2006. – 1 (1). – С. 23–29.Сорочинская У.Б., Михайленко В.М. Применение метода «ДНК-комет» для оценки повреждений ДНК, вызванных различными агентами окружающей среды // Онкология. – 2008. – Т.10, №3. – С. 303–309.Сорочинская У.Б., Михайленко В.М. Применение метода «ДНК-комет» для оценки повреждений ДНК, вызванных различными агентами окружающей среды // Онкология. – 2008. – Т.10, №3. – С. 303–309.Дурнев А.Д., Жанатаев А.К., Анисина Е.А. и др. Применение метода щелочного гель-электрофореза изолированных клеток для оценки генотоксических свойств природных и синтетических соединений: методические рекомендации. – М., 2006. – 28 с.Дурнев А.Д., Жанатаев А.К., Анисина Е.А. и др. Применение метода щелочного гель-электрофореза изолированных клеток для оценки генотоксических свойств природных и синтетических соединений: методические рекомендации. – М., 2006. – 28 с.Жанатаев А.К., Никитина В.А., Воронина Е.С., Дурнев А.Д. Методические аспекты оценки ДНК-повреждений методом «ДНК-комет» // Прикладная токсикология. – 2011. – Т.2, №2 (4). – С. 28–37.Жанатаев А.К., Никитина В.А., Воронина Е.С., Дурнев А.Д. Методические аспекты оценки ДНК-повреждений методом «ДНК-комет» // Прикладная токсикология. – 2011. – Т.2, №2 (4). – С. 28–37.Hartmann A. et al. Recommendations for conducting the in vivo alkaline comet assay // Mutagenesis. – 2003. – V. 18. – Р. 45–51.Hartmann A. et al. Recommendations for conducting the in vivo alkaline comet assay // Mutagenesis. – 2003. – V. 18. – Р. 45–51.Kumaravel T.S., Vilhar B., Stephen P. et al. Comet Assay measurements: a perspective // Cell Biol. Toxicol. – 2009. – 25 (1). – P. 53–64.Kumaravel T.S., Vilhar B., Stephen P. et al. Comet Assay measurements: a perspective // Cell Biol. Toxicol. – 2009. – 25 (1). – P. 53–64.Оценка генотоксических свойств методом «ДНКкомет» in vitro: методические рекомендации. – М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2010.Оценка генотоксических свойств методом «ДНКкомет» in vitro: методические рекомендации. – М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2010.Tomáš Gichner, Zdeˇnka Patková, Jiˇrina Száková, Kateˇrina Demnerová. Cadmium induces DNA damage in tobacco roots, but no DNA damage, somatic mutations or homologous recombination in tobacco leaves // Mutation Research. – 2004. – 559. – С. 49–57.Tomáš Gichner, Zdeˇnka Patková, Jiˇrina Száková, Kateˇrina Demnerová. Cadmium induces DNA damage in tobacco roots, but no DNA damage, somatic mutations or homologous recombination in tobacco leaves // Mutation Research. – 2004. – 559. – С. 49–57.Olive PL. DNA damage and repair in individual cells: applications of the comet assay in radiobiology // Int J Radiat Biol. – 1999. – 75. – С. 395–405.Olive PL. DNA damage and repair in individual cells: applications of the comet assay in radiobiology // Int J Radiat Biol. – 1999. – 75. – С. 395–405.Xie H., Wise S.S., Holmes A.L. et al. Carcinogenic lead chromate induces DNA double-strand breaks in human lung cells // Mutat Res. – 2005. – 586 (2). – С. 160–172.Xie H., Wise S.S., Holmes A.L. et al. Carcinogenic lead chromate induces DNA double-strand breaks in human lung cells // Mutat Res. – 2005. – 586 (2). – С. 160–172.Yasuhara S., Zhu Y., Matsui T. et al. Comparison of comet assay, electron microscopy and flow cytometry for detection of apoptosis // Journal Histochem. Cytochem. – 2003. – 51 (7). – P. 873–885.Yasuhara S., Zhu Y., Matsui T. et al. Comparison of comet assay, electron microscopy and flow cytometry for detection of apoptosis // Journal Histochem. Cytochem. – 2003. – 51 (7). – P. 873–885.Olive P.L., Banath J.P. Sizing highly fragmented DNA in individual apoptotic cells using the comet assay and a DNA crosslinking agent // Exp. Cell Res. – 1995. – 221 (1). – P. 19–26.Olive P.L., Banath J.P. Sizing highly fragmented DNA in individual apoptotic cells using the comet assay and a DNA crosslinking agent // Exp. Cell Res. – 1995. – 221 (1). – P. 19–26.Collins A.R., Duthie S.J. and Dobson V.L. Direct enzymic detection of endogenous oxidative base damage in human lymphocyte DNA // Carcinogenesis. – 1993. – 14. – P. 1733–1735.Collins A.R., Duthie S.J. and Dobson V.L. Direct enzymic detection of endogenous oxidative base damage in human lymphocyte DNA // Carcinogenesis. – 1993. – 14. – P. 1733–1735.Collins A.R., Dusinska M. and Horska A. Detection of alkylation damage in human lymphocyte DNA with the comet assay // Acta Biochim. Polon. – 2001. – 48. – P. 611–614.Collins A.R., Dusinska M. and Horska A. Detection of alkylation damage in human lymphocyte DNA with the comet assay // Acta Biochim. Polon. – 2001. – 48. – P. 611–614.Smith C.C., O’Donovan M.R. and Martin E.A. HOGG1 recognizes oxidative damage using the comet assay with greater specificity than FPG or ENDOIII // Mutagenesis. – 2006. – 21. – P. 185–190.Smith C.C., O’Donovan M.R. and Martin E.A. HOGG1 recognizes oxidative damage using the comet assay with greater specificity than FPG or ENDOIII // Mutagenesis. – 2006. – 21. – P. 185–190.Dusinska M. and Collins A. Detection of lbumin purines and UV-induced photoproducts in DNA of single cells, by inclusion of lesion specific enzymes in the comet assay // Altern. Lab. Anim. – 1996. – 24. – P. 405–411.Dusinska M. and Collins A. Detection of lbumin purines and UV-induced photoproducts in DNA of single cells, by inclusion of lesion specific enzymes in the comet assay // Altern. Lab. Anim. – 1996. – 24. – P. 405–411.Duthie S.J. and McMillan P. Uracil misincorporation in human DNA detected using single cell gel electrophoresis // Carcinogenesis. – 1997. – 18. – P. 1709–1714.Duthie S.J. and McMillan P. Uracil misincorporation in human DNA detected using single cell gel electrophoresis // Carcinogenesis. – 1997. – 18. – P. 1709–1714.Merk O., Speit G. Detection of crosslinks with the comet assay in relationship to genotoxicity and cytotoxicity // Environ. Mol. Mutagen. – 1999. – 33 (2). – P. 167–172.Merk O., Speit G. Detection of crosslinks with the comet assay in relationship to genotoxicity and cytotoxicity // Environ. Mol. Mutagen. – 1999. – 33 (2). – P. 167–172.Spanswick V.J., Hartley J.M., Hartley J.A. Measurement of DNA interstrand crosslinking in individual cells using the single cell gel electrophoresis (comet) assay // Methods Mol. Biol. – 2010. – 613. – P. 267–282.Spanswick V.J., Hartley J.M., Hartley J.A. Measurement of DNA interstrand crosslinking in individual cells using the single cell gel electrophoresis (comet) assay // Methods Mol. Biol. – 2010. – 613. – P. 267–282.Hartley J.M., Spanswick V.J., Gander M. et al. Measurement of DNA cross-linking in patients on ifosfamide therapy using the single cell gel electrophoresis (comet) assay // Clin. Cancer Res. – 1999. – 5. – P. 507– 512.Hartley J.M., Spanswick V.J., Gander M. et al. Measurement of DNA cross-linking in patients on ifosfamide therapy using the single cell gel electrophoresis (comet) assay // Clin. Cancer Res. – 1999. – 5. – P. 507– 512.Wentzel J.F., Gouws C., Huysamen C. et al. Assessing the DNA methylation status of single cells with the comet assay // Anal. Biochem. – 2010. – 400 (2). – P. 190–194.Wentzel J.F., Gouws C., Huysamen C. et al. Assessing the DNA methylation status of single cells with the comet assay // Anal. Biochem. – 2010. – 400 (2). – P. 190–194.The National Toxicology Program, Report on Carcinogens. – 2007; Eleventh edition.The National Toxicology Program, Report on Carcinogens. – 2007; Eleventh edition.Sasaki YF, Sekihashi K, Izumiyama F. et al. The comet assay with multiple mouse organs: comparison of comet assay results and carcinogenicity with 208 chemicals selected from the IARC monographs and US NTP Carcinogenicity Database // Crit Rev Toxicol. – 2000. – 30 (6). – С. 629–799.Sasaki YF, Sekihashi K, Izumiyama F. et al. The comet assay with multiple mouse organs: comparison of comet assay results and carcinogenicity with 208 chemicals selected from the IARC monographs and US NTP Carcinogenicity Database // Crit Rev Toxicol. – 2000. – 30 (6). – С. 629–799.Токсиколого-гигиеническая оценка безопасности наноматериалов: методические указания. – М.: Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, 2009.Токсиколого-гигиеническая оценка безопасности наноматериалов: методические указания. – М.: Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, 2009.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.